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Mar 18, 2023

25OHD 유사체 및 진공 채혈 튜브는 자동 면역분석의 정확성에 큰 영향을 미칩니다

과학 보고서 5권,

Scientific Reports 5권, 기사 번호: 14636(2015) 이 기사 인용

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측정항목 세부정보

비타민 D 정량 방법의 변형이 크고 비타민 D 유사체 및 채혈 방법의 영향이 체계적으로 조사되지 않았습니다. 우리는 5가지 면역분석 시스템과 액체 크로마토그래피-탠덤 질량 분석법(LC-MS/MS)을 사용하여 비타민 D 유사체 25OHD2 및 3-epi 25OHD3와 혈액 수집 방법이 비타민 D 측정에 미치는 영향을 평가했습니다. 25OHD2 또는 3-에피 25OHD3이 있거나 없는 샘플을 포함하여 일상적인 비타민 D 분석 요청에서 혈청 샘플(332개)을 선택하고 다양한 면역분석 시스템을 사용하여 분석했습니다. 25OHD2 또는 3-epi 25OHD3가 없는 샘플에서 모든 면역분석은 LC-MS/MS와 좋은 상관관계가 있었습니다. 그러나 Siemens 시스템은 응고 활성화제와 겔 분리기가 있는 튜브를 사용할 때 12.5ng/mL의 큰 양의 평균 편향과 낮은 Kappa 값을 생성했습니다. 25OHD2 또는 3-epi 25OHD3가 존재하는 경우 모든 면역분석에서 상관관계와 임상적 일치가 감소했습니다. Siemens 시스템으로 측정했을 때 젤과 응고 활성제가 포함된 VACUETTE 튜브의 혈청 25OHD는 첨가제가 없는 VACUETTE 튜브에 수집된 샘플보다 훨씬 더 높은 값을 생성했습니다. 첨가물이 없는 튜브를 사용할 때 편견이 감소하고 임상적 일치도가 크게 향상되었습니다. 결론적으로, 대부분의 자동화된 면역분석법은 LC-MS/MS와 허용 가능한 상관관계 및 일치성을 보여주었습니다. 그러나 25OHD 유사체와 혈액 수집 튜브는 정확도에 큰 영향을 미쳤습니다.

비타민 D와 뼈 질환1, 당뇨병2, 자가면역 질환3, 심혈관 질환4 및 암5 사이의 연관성에 대한 최근 증거와 함께 비타민 D 결핍이 흔하다는 인식으로 인해 전 세계적으로 비타민 D 검사가 엄청나게 증가했습니다1,6,7. 예를 들어, Mayo 클리닉에서는 비타민 D 결핍에 대한 검사가 연간 80~90% 증가했으며6 우리 연구실에서는 지난 2년 동안 검사 횟수가 두 배로 늘어났습니다. 이러한 작업량이 증가함에 따라 최근 자동화된 면역분석법이 개발되었습니다. 그러나 비타민 D 수준을 테스트하는 데 사용되는 방법에는 큰 차이가 있습니다6,8,9.

순환하는 하이드록시비타민 D(25OHD)는 비타민 D의 주된 형태이며 일반적으로 혈청 비타민 D 농도의 가장 신뢰할 수 있는 바이오마커로 간주됩니다10. 25OHD3와 25OHD2는 25OHD의 두 가지 주요 유형입니다. 25OHD3는 햇빛 노출에 반응하여 동물의 피부에서 내생적으로 생성되며 25OHD3 함유 보충제를 통해 식단에서 얻을 수 있습니다. 25OHD2는 곰팡이에서 발견됩니다. 25OHD2 또는 D3는 보충제 또는 유제품과 같은 식품의 첨가물로 사용될 수 있습니다1. 그러나 최근에는 25OHD3의 에피머인 3-epi 25OHD3가 확인되었습니다. 이 유사체의 생체 활성은 여전히 ​​불분명하지만11,12, 3-에피 25OHD3은 면역분석에서 25OHD3과 교차 반응을 유발하여 25OHD 수준을 과대평가하는 것으로 나타났습니다.

25OHD 검출을 위해 다양한 자동 면역분석법이 개발되었습니다. 그러나 실험실 간의 변동은 38%만큼 높은 것으로 보고되었습니다6,8,13. 또한, 비타민 D 결핍의 정의는 여전히 논란의 여지가 있으며 방법에 따라 큰 차이가 있어 논란이 되고 있습니다. 이러한 큰 차이는 다양한 방법에 대해 동일한 비타민 D 결핍 기준을 사용하는 임상 진단 적용에 문제가 될 것으로 예상됩니다. 따라서 다양한 방법의 임상적 균일성을 평가해야 합니다.

동위원소 희석 액체 크로마토그래피-탠덤 질량 분석법(LC-MS/MS)은 25OHD 테스트를 위한 최적의 표준이자 참조 방법으로 간주됩니다14. 그러나 가장 일반적으로 사용되는 LC-MS/MS 접근법과 비교 방법의 기초를 형성한 접근법에는 25OHD3에서 3-epi 25OHD3의 분리가 포함되지 않았습니다. 이는 크로마토그래피를 통한 시간 소모적인 분석이 필요하고 이로 인해 검출 효율성이 감소하기 때문입니다. 고립된 연구에서만 3-epi 25OHD3가 LC-MS/MS를 사용하여 측정되었습니다14,15.